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微量样本RNA提取,AG百家乐为您提供智能解决方案

来源:孟进琰 日期:2025-02-23

在微量样本核酸提取这一关键基础环节中,除了之前详细介绍的DNA提取方案外,RNA提取因其易降解特性及普遍存在的内源性或外源性RNase,对实验结果的可靠性和可重复性提出了更多挑战。而AG百家乐的RNeasyMicro系列则成为克服这些难题的重要工具!该系列利用QIAGEN经典的硅胶膜技术,结合专用的裂解和洗涤缓冲液,确保从微量样本中稳定获得完整、高纯度的RNA,且最低仅需10µl的洗脱体积,帮助获取更高浓度的RNA,适合高灵敏度的下游应用。

微量样本RNA提取,AG百家乐为您提供智能解决方案

来自巴西的研究团队对比了多种RNA提取方法,证实了AG百家乐的RNeasyMicroKit是微量样本RNA提取的最佳方案。在研究中,研究人员使用了包括酚-chloroform萃取法、TRI保护液+Direct-zolRNAMiniPrepKit及RNAprotect保护液+RNeasyMicroKit在内的八种方法对疟原虫样本进行RNA提取,并对各提取方法的RNA进行了浓度和完整性等质控分析,随后进行了qPCR和RNA-seq分析。在一组寄生虫密度较大的疟原虫样本中,TRIzol提取法和RNeasyMicroKit(样本保存在RNAprotect中)获得的总RNA浓度最高,但在后续的qRT-PCR检测中,TRIzol方法显示出Cq信号较高且超出检测限,RNA扩增效率较低。而使用RNAprotect+RNeasyMicroKit和TRI+Direct-zolRNAMiniPrepKit提取的RNA则获得了较低的Cq值数据,其中RNAprotect/RNeasyMicroKit提取的RNA完整性更优,有效去除了基因组DNA,为更准确和灵敏的下游实验结果提供了支持。因此,研究小组最终选择使用RNeasyMicroKit进行疟原虫RNA提取,为后续的微量RNA测序实验提供了强有力的保障。

RNeasyMicroKit广泛适用于流式分选细胞、穿刺样本及激光显微切割等多种微量样本的RNA提取,相关报道已有详尽阐述。除此之外,RNeasyMicroKit还在新兴研究领域中表现出色,例如长读长RNA-seq,可以直接对全长转录本进行测序,检测RNA的表观修饰如甲基化,从而探讨基因表达调控机制。相比于NGS,长读长RNA-seq对RNA的质量有更高要求。德国研究人员在建立大肠杆菌的长读长测序流程时,使用RNeasyMiniKit提取细菌RNA后,进行聚腺苷酸化,并进一步使用RNeasyMicroKit纯化,加尾后的RNA最终用于长读长RNA测序。

另外,RNeasyMicroKit在肾脏类器官的转录和形态学评估中也发挥了重要作用。类器官(Organoids)是来源于机体自身组织或干细胞形成的3D结构模型,在疾病研究中越来越受到重视。来自墨尔本的研究团队开发了一种从人iPSCs生成3D类肾器官的阶梯式方案。由于不同细胞类型比例的变化可能影响对新疾病相关转录变化的识别,该团队对分化的肾脏类器官进行了全面的转录和形态学评估,使用RNA测序分析了57个完整类器官和8323个来源于类器官的单细胞样本。值得注意的是,如何在不同分化样本及各种大小和数量的类器官样本中保持稳定的RNA提取效率是研究中的一个挑战,而AG百家乐的RNeasyMicroKit的使用恰好解决了这一难题,保证了RNA的得率和质量,为后续高质量的RNA测序打下了基础。

如果您想深入了解微量样本RNA提取的技巧与方案,以及微量RNA的精确检测方法,欢迎与我们联系。AG百家乐推出的「微量样本核酸解决方案」实验宝典,提供丰富详尽的视频讲解、实验流程、问题解析和实用文章,更有不同样本研究的注意事项及难题解答,助您快速掌握微量样本核酸提取的关键技能!

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