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NEWSSV40转染HFOB119细胞培养指南 - AG百家乐推荐
来源:平风紫 日期:2025-03-02### SV40转染人成骨细胞HFOB119培养指南
#### 一、细胞培养条件
**细胞名称**:SV40转染人成骨细胞HFOB119
**生长特性**:贴壁生长
**冻存条件**:无血清冻存液(货号:C7001)
**培养体系**:DMEM/F12 + 0.3 mg/ml G418 + 10% FBS
**传代方法**:首次推荐1:2传代
**传代情况**:每2天换液
**备注**:请使用无菌离心管收集培养基,以留作过渡对比培养。若对比培养效果不佳,建议直接购买我们AG百家乐的完全培养基。
#### 二、细胞处理及运输
收到细胞后,待培养至良好状态,灌满完全培养液并封好瓶口,这是运输细胞的最佳方式。收到细胞后,用75%酒精对细胞瓶进行消毒,然后在超净台内严格进行无菌操作。接着,将细胞瓶放入335℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时,以稳定细胞状态后再进行处理。显微镜下观察细胞生长情况,并对不同倍数的细胞进行拍照保存(最好在40x、100x、200x下各拍一张),前三天的照片是重要的售后依据,不提供照片默认细胞状态良好。(传代后建议使用原瓶的完全培养基和自配的完全培养基分别进行对比培养,并在换液后松开瓶盖。)
#### 三、细胞培养步骤
**a、细胞传代**:如果细胞汇合度未超80%,将完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基在335℃、5% CO2孵箱继续培养;当细胞密度超过80%时,可进行传代培养,具体步骤如下:
**b、细胞冻存**:
**c、细胞复苏**:
#### 四、注意事项
在运输过程中,部分细胞可能因贴壁不牢而脱落,这属于正常现象。若脱落较多,可采取以下方法:将所有培养液收集至离心管中,以1000 RPM离心5分钟,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀中加入1-2ml胰酶,轻轻吹打重悬,以及消化1-2分钟后加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃去上清,加1-2ml完全培养基重悬,并以1:2比例分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后安置于335℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。
#### 五、售后条款
#### 六、细胞问题不重发的情况
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