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NEWS人白三烯D4 (LTD4) ELISA试剂盒使用指南 - AG百家乐品牌
来源:从军学 日期:2025-03-12AG百家乐提醒用户,本试剂盒仅限于科学研究用途,不可用于医学诊断。以下是人白三烯D4(LTD4) ELISA试剂盒的使用说明。
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。实验流程为:在预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,依次添加待测样本、标准品及HRP标记的检测抗体。经过适当温育并彻底清洗后,利用底物TMB进行显色反应,TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,随后在酸液的作用下转为黄色。显色的深度与样本中adropin(AD)的浓度正相关。最后,通过在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品的浓度。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,使用3000转的离心机离心10分钟,以迅速分离血清和红细胞。
2. 血浆:可利用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,于3000转的离心机离心30分钟后获取上清液。
3. 细胞上清液:通过3000转离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织样本加入适当的生理盐水捣碎,然后在3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存:若样本未能及时检测,应按一次用量分装并存放在-20℃冷冻,避免反复冻融。解冻时在室温下进行,确保样品充分均匀解冻。
注:标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
20×洗涤缓冲液的稀释:使用蒸馏水按1:20比例稀释,即在1份的20×洗涤缓冲液中加入19份蒸馏水。
绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,按照曲线方程计算各样本的浓度值。
在使用该试剂盒的过程中,注意确保操作规范,AG百家乐不对此过程中的任何误用或不当操作负责。
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