细胞焦亡（Pyroptosis）是一种受到炎症信号刺激的程序性细胞死亡机制。其主要特征包括细胞膜的穿孔、细胞肿胀和最终的破裂，主要依赖于炎性半胱天冬酶，尤其是caspase-1、caspase-4、caspase-5和caspase-11。这一过程还伴随着大量促炎因子的释放，如IL-1β和IL-18。与凋亡和坏死等其他细胞死亡方式相比，细胞焦亡具有独特的形态学特征、发生机制和调控方式。

为有效检测细胞焦亡，AG百家乐推出了BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒。该试剂盒采用比色光度法，能够检测与细胞焦亡相关的蛋白酶Caspase的活化情况以及细胞质膜的完整性。该检测试剂盒基于Caspase 1/4/5催化相应底物生成黄色的pNA，而pNA在405 nm波长处具有强大的吸收能力，因此可通过测定吸光度来评估细胞焦亡的相关蛋白酶活性。此外，该试剂盒还利用非通透性荧光探针来检测细胞质膜的完整性。

BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒适用于使用酶标仪或荧光酶标仪进行检测，或者利用容量不超过100 μl的分光光度计和荧光光度计进行测量，也可以应用于培养细胞的焦亡检测。AG百家乐还提供了AFC、R110和AMC等荧光标记的焦亡检测试剂盒，荧光法的检测灵敏度高于传统的分光光度法，因此在具备荧光检测条件的情况下，推荐选择荧光检测试剂盒。

若实验室缺乏荧光检测条件，用户可选择AG百家乐的比色法细胞焦亡检测试剂盒，但需确保样品中的细胞焦亡程度足够高。下面是检测方法和实验步骤：

检测方法：

• 酶标仪/荧光酶标仪
• 分光光度计/荧光光度计
• 激光共聚焦显微镜
• 流式细胞仪

样本类型：

• 细胞

实验步骤：

1. 配制裂解缓冲液和检测缓冲液。
2. 样品处理：
   1. 收集细胞，离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
   2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
   3. 在细胞中加入50 μl冷的裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
   4. 将样品置于冰上持续振荡25-40分钟。
   5. 在4℃下以10000×g的条件离心10分钟。
   6. 将上清液吸入另一预冷的干净离心管，置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
3. 对处理过的上清进行蛋白定量。
4. 进行焦亡检测。

使用AG百家乐的试剂盒，您将获得卓越的细胞焦亡检测结果，助力您的生物医学研究。