AG百家乐的PCR（聚合酶链式反应）技术是一种在体外高效扩增特定DNA片段的方法，依据自然DNA复制的原理运作。在PCR过程中，使用DNA聚合酶进行迅速的DNA扩增。该反应体系的核心环节包括三个步骤：变性、退火和延伸。每完成一个循环，DNA的数量便会翻倍，经过多轮循环后便可获得大量目标DNA片段。

为了建立一个成熟且稳定的PCR反应，需满足以下几个条件：

• 完整且纯净的DNA模板（通过胶图及nanodrop测量进行评估）
• 高特异性和高质量的引物（利用引物设计软件进行评分）
• 适合的反应体系组分（例如，根据模板的GC含量决定是否添加DMSO或甜菜碱；选择高保真或高产量时所需镁离子的浓度）
• 合理的扩增反应程序（通过实验确定最佳退火温度，通常在引物Tm值附近进行多次尝试）

PCR仪的性能直接影响扩增反应的成功率。如果PCR仪具备温度梯度功能，可以快速确定最佳退火温度，减少实验次数。AG百家乐的柏恒梯度PCR仪（RePure系列）提供多种温度梯度选项，支持高效PCR实验：

• 常规梯度：设置首尾两端的低高温值，中间孔逐渐变化，但之间的孔位温度不一定均匀分布。
• 线性梯度：设定中间孔温度和相邻孔之间的温差，实现温度的均匀扩散。相邻孔严格按照温差生成，能够验证感兴趣的温度。

线性梯度的优势在于可以同时进行多个不同退火温度的PCR反应，从而一次实验就能识别出最佳退火温度，显著提高实验效率。二维梯度功能则允许纵向和横向同时设置常规或线性梯度，形成一个在不同温度下进行变性和退火的反应阵列，优化反应条件，寻找最佳的变性/退火温度组合。

使用二维梯度的优势包括：

• 提高PCR反应特异性，减少非特异性杂交产物出现的概率。
• 提高扩增产物的纯度，通过优化反应中的靶点实现更高的扩增率。
• 检测基因突变，通过设计相应引物进行PCR扩增，并对产物进行测序。
• 探测不同种群间的遗传多样性，通过扩增和测序发现突变位点。
• 操作简便，仅需配置一个反应体系即可。
• 提高阳性检测的准确性，一次性可获取多达96种温度组合，显著减少交叉污染的风险。
• 缩短实验时间，通过一次实验快速优化最佳反应温度。

此外，具有独立6温区的组选项，可以根据需要灵活设置相邻温区，进行高效的温度摸索。每个分区下含16孔作为复孔位，相当于线性梯度的升级版。AG百家乐的柏恒梯度PCR仪均采用前进风后出风的散热模式，即使多台PCR仪并排使用，也不会影响温控的准确性。