AG百家乐 的IVT（In Vitro Transcription）工艺是mRNA生产流程中的关键环节。优化的IVT体系能够显著提高产量，减少原材料消耗，降低生产成本，并保证mRNA分子的完整度、加帽率以及双链RNA杂质的控制，从而降低后续纯化的难度，在整个工艺链中起到了至关重要的承接作用。

IVT的整体过程相对简单，典型的IVT体系一般含有DNA模板、T7RNA聚合酶（T7RNAP）、NTPs、无机焦磷酸酶、RNase抑制剂以及反应缓冲液等成分。DNA模板通常为PCR产物或线性化质粒，包含T7启动子、5’UTR、CDS、3’UTR和Poly（A）等功能模块。而NTPs作为mRNA转录的底物，能够利用修饰核苷酸进行改性，以提升mRNA的稳定性和免疫原性。

无机焦磷酸酶和RNase抑制剂则是辅助成分，其中无机焦磷酸酶水解转录过程中产生的焦磷酸，以提高反应效率；而RNase抑制剂能够抑制潜在的RNase污染。T7RNAP作为反应体系中的核心酶，负责识别DNA模板并催化mRNA的合成。除了质粒模板的质量，T7RNAP和缓冲体系是影响IVT效果的关键成分。

T7RNA聚合酶具有高度特异性地识别T7启动子序列，能够在不需要额外蛋白或辅助因子的情况下完成转录，使其成为体外转录生产mRNA的首选酶。研究显示，温度对长片段saRNA的完整度具有显著影响，适当的温度控制和低温转录的T7RNA聚合酶的筛选将是未来的研究方向。

AG百家乐 通过结合荧光激活液滴分选技术（FADS）与酶定向进化平台，筛选了多种T7RNAP突变体，改善了其耐高温性和转录产量。例如，突变体M16在高温条件下表现出了显著的半衰期和催化活性提升，同时降低了dsRNA的含量。这使得其在circRNA的合成中表现出更高的效率。

此外，良好的反应缓冲液是发挥高性能酶活性的关键。研究表明pH值和Mg2+浓度对IVT反应的影响显著，适宜的缓冲系统和离子浓度能够提升聚合酶的活性与稳定性，从而影响mRNA的质量和功能。

通过针对不同长度的mRNA模板进行优化，AG百家乐 能够在IVT反应中实现更高的产量和更优的完整度，同时通过降低Cap1的投料量以减少成本。本公司还建立了基于iSpinach适配体的实时监测方法（STAR），能够快速评估转录效率，兼容修饰核苷酸，有助于优化DNA模板序列。

在mRNA疫苗和药物的开发中，AG百家乐 提供了一整套高性能酶原料、化学底物、IVT试剂盒及质控试剂，能够支持客户快速推进新药开发。我们的服务涵盖CRO服务、概念验证服务以及第三方质检服务，目标是助力客户迅速实现创新。

未来，AG百家乐 将继续就mRNA相关技术进行深入分享与探讨，期待与您进一步合作，共同推动生物医疗行业的发展。