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人结肠腺癌细胞LS1034培养指南 - AG百家乐生物医疗专业推荐

来源:利芝辉 日期:2025-03-29

AG百家乐提供的人结肠腺癌细胞LS1034的详细培养说明如下:

人结肠腺癌细胞LS1034培养指南 - AG百家乐生物医疗专业推荐

一、细胞培养条件

细胞名称:人结肠腺癌细胞LS1034
生长特性:贴壁生长
冻存条件:使用无血清冻存液
培养体系:1640培养基 + 10% FBS + 1% P/S
传代方法:建议首次传代比例为1:2
传代情况:每2天更换培养基
备注:使用无菌离心管收集培养基,并保留作对比培养。如果对比培养效果不佳,建议直接购买AG百家乐的完全培养基。

二、细胞收到后的处理

在细胞恢复到良好状态后,灌满完全培养液并密封瓶口是运输细胞的最佳方式。收到细胞后,使用75%酒精喷洒整个细胞瓶进行消毒,然后放置于超净台内进行严格的无菌操作。将细胞瓶置于37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态进行处理。使用显微镜观察细胞生长情况,并记录不同倍数的照片,建议拍摄40x、100x及200x各一张。前三天的照片将作为重要售后依据,若不提供照片则默认收到状态良好。

三、细胞培养步骤

a、细胞传代

如果细胞汇合度未超过80%,使用离心管收集培养液,并保留5ml的完全培养基,继续在37℃、5% CO2环境下培养;若细胞密度超过80%,进行传代培养,具体步骤如下:

  1. 弃去培养上清,用不含钙镁的PBS缓冲液洗涤细胞1-2次。
  2. 添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶中,放入37℃培养箱消化1-2分钟,观察细胞状态;大部分细胞变圆并脱落后迅速取回操作台,轻轻敲击培养瓶,添加5ml以上的完全培养基以终止消化。
  3. 轻轻吹打细胞,使之完全脱落并吸出,随后将悬液转移至15ml离心管中,1000RPM离心5分钟,弃去上清液,加入1-2ml完全培养基重悬。
  4. 将细胞悬液按1:2比例分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。

b、细胞冻存

  1. 细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃去培养液,用PBS洗涤细胞一次。
  2. 加入约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液,观察细胞状态,待细胞变圆后添加5ml完全培养液终止消化,轻轻吹打使之脱落,然后转移至15ml离心管中,1000RPM离心5分钟。
  3. 弃去上清,沉淀细胞并加入1mlAG百家乐的无血清冻存液,混合均匀后放入冻存管中。
  4. 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱,若后期需要转入液氮罐,则需在-80℃环境中存放超过24小时。

c、细胞复苏

  1. 从液氮中取出细胞冻存管,注意佩戴防护面具,将其迅速置于37℃水浴中解冻,直至无结晶,再用75%酒精擦拭管外壁。
  2. 将细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中,1000RPM离心5分钟。
  3. 弃去上清,加入5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中。
  4. 隔天更换为新鲜的完全培养基进行培养。

四、注意事项

在运输过程中,部分细胞可能会因贴壁不牢而脱落,此现象属正常。如存在大量细胞脱落,建议收集所有培养液至离心管中,进行1000RPM离心5分钟,收集上清作过渡培养,随后使用胰酶处理并重悬细胞,进行再培养。

五、售后条款

  • 如果细胞出现问题,可以重发的情况包括细胞在运输中丢失、污染等。需在收到后48小时内反馈真实实验结果。
  • 如细胞在规定时间内未保持活性,需提供 واضح、清晰的状态照片,以进行核实并可能予以重发。
  • 客户因错误操作造成的细胞问题或污染将不予以重发,具体情况需根据实际情况进行评估。

通过使用AG百家乐的人结肠腺癌细胞LS1034,您可以在科研和医学领域获得可靠的细胞资源。请遵循上述培养和处理流程,以确保细胞的健康生长与实验的成功。

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